相同，二者可重疊成混合感染，目前尚無滿意治療。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用雙表達(dá)載體進(jìn)行了聯(lián)合基因免疫研究以尋找防治HCV／HBV重疊或混合感染的、新的高效聯(lián)合基因免疫策略。 本實(shí)驗(yàn)分別將與HCV核心區(qū)基因互補(bǔ)的CDNA和HBV核心區(qū)基因克隆于真核表達(dá)載體，構(gòu)建pRSC－HBV／HCB，轉(zhuǎn)染小鼠骨髓瘤細(xì)胞（SP2／0），通過免疫熒光和Western印跡法檢測(cè)蛋白的表達(dá)，用酶聯(lián)免疫法、乳酸脫氫酶釋放法及荷瘤試驗(yàn)觀察小鼠體液免疫應(yīng)答及細(xì)胞免疫應(yīng)答。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果，pRSC－HBV／HCV轉(zhuǎn)染的SP2／0細(xì)胞可見HBcAg及HCV核蛋白染色陽性熒光細(xì)胞，相對(duì)分子質(zhì)量1400及2100處均可見蛋白條帶，Western印跡分析可見特異性的蛋白條帶。10只免疫鼠中全部出現(xiàn)抗－HCV及抗HBV抗體，而對(duì)照組（n＝10）全為陰性。免疫組小鼠脾細(xì)胞對(duì)轉(zhuǎn)染pRSC－HBV／HCV的SP2／0細(xì)胞的細(xì)胞毒活性明顯高于對(duì)照組，荷瘤試驗(yàn)顯示免疫組小鼠注射轉(zhuǎn)染pRSC－HBV／HCV的SP2／0細(xì)胞后腫瘤生長(zhǎng)緩慢。 慢性
乙肝及
丙肝患者體內(nèi)病毒難以清除的原因之一是機(jī)體細(xì)胞免疫功能障礙，尤其是針對(duì)主要靶抗原即核抗原的特異性細(xì)胞免疫應(yīng)答低下。本研究的結(jié)果提示pRSC－HBV／HCV在Ballb／c小鼠體內(nèi)可同時(shí)獲得對(duì)HBV核蛋白與HCV核蛋白的特異性體液免疫應(yīng)答及細(xì)胞免疫應(yīng)答，從而為聯(lián)合基因免疫提供了新的策略和思路。
