丙肝疫苗的研究現(xiàn)狀:蛋白疫苗
1 肽疫苗 抗原之所以能誘導(dǎo)特異的體液及細(xì)胞免疫反應(yīng)，是由于它在機(jī)體細(xì)胞中被分解為多肽后與MHC-Ⅱ類或MHC I 類分子結(jié)合，以復(fù)合物的形式激活了Th細(xì)胞，誘生了特異性抗體及CTL[3]。HCV中的某些T細(xì)胞表位對病毒的清除十分重要，若能得到這些多肽，使其在體內(nèi)或體外直接與MHC I類或MHC-Ⅱ類分子結(jié)合，則所得到的復(fù)合物將能有效地刺激機(jī)體產(chǎn)生保護(hù)性免疫應(yīng)答而避免了抗原遞呈的步驟?；谏鲜黾僭O(shè)，人們構(gòu)建了一系列HCV的疫苗多肽，或使之與MHC分子結(jié)合成復(fù)合物，并從中篩選出了一些對研制HCV疫苗具有重要意義的HCV抗原多肽。現(xiàn)今絕大部分工作都在確定具有免疫原性的肽而不是測試最有希望的肽疫苗。在肽疫苗研究中，一個(gè)經(jīng)典的方法是用HCV感染患者的血清來篩選噬菌體表達(dá)的肽文庫，然后選擇出與患者血清特異反應(yīng)的肽段。用HCV感染的患者血清來篩選在噬菌體文庫中表達(dá)的數(shù)目巨大的HVR 1的所有肽段，可以選擇出既有抗原性又有免疫原性的肽段作為那些HVR 1發(fā)生變異的數(shù)目巨大的變異體的類似物。
2 包膜蛋白疫苗 HCV包膜El／E2糖蛋白是HCV的表面蛋白，因而最先被用作誘導(dǎo)中和抗體的候選疫苗靶抗原。黑猩猩試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，只有哺乳動物細(xì)胞重組表達(dá)的E2蛋白或者El／E2異二聚體蛋白免疫能抵抗同株HCV攻擊，而用昆蟲細(xì)胞、酵母和大腸桿菌表達(dá)的E2蛋白不起保護(hù)作用。由于HCV高度變異的特點(diǎn)，這種方法顯然還不足以誘導(dǎo)廣泛保護(hù)性的中和抗體。然而選擇合適的免疫佐劑，對慢性HCV感染者接種重組El／E2蛋白也許可通過增強(qiáng)感染者的細(xì)胞免疫應(yīng)答而促進(jìn)病毒清除。Leroux-Roels等[4]用HCV H 77株E2區(qū)合成肽免疫兔，產(chǎn)生了抗同源性合成肽的高活性抗體。將抗體與等體積含有64個(gè)CID 50的H 77株中和后再分別注射2只黑猩猩。研究表明，H 77株至少有19種不同來源病毒株同時(shí)存在，E2中的HVR 1具有關(guān)鍵的抗體中和表位，從該區(qū)產(chǎn)生的合成肽能激發(fā)中和抗體產(chǎn)生并能保護(hù)黑猩猩對同源性HCV的攻擊，但對HCV基因有變異的突變體沒有中和作用。一些研究顯示，E2中抗HVR 1與中和HCV感染有關(guān)，有人從急性
肝炎患者分離的H 77株，用其HVR1區(qū)合成的21個(gè)多肽免疫家兔，用ELISA法證實(shí)該免疫血清能防止H 77株感染HPB Ma細(xì)胞，但不能阻斷對H 77株的突變株H 90株的感染，該結(jié)果表明，抗HVR 1抗體的中和作用具有高度特異性。Sällberg等[5]用多種E1和E2重組蛋白與人T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞孵育，結(jié)果只有哺乳細(xì)胞表達(dá)的E2重組蛋白能與人T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞結(jié)合，并發(fā)現(xiàn)E2免疫的兔血清能中和E2對靶細(xì)胞的結(jié)合作用，此種抗體叫作中和結(jié)合抗體，對HCV感染有一定的防護(hù)作用。
盡管HCV的蛋白類疫苗目前取得了一些進(jìn)展，但是還是處于一個(gè)早期階段。許多策略也證實(shí)對小鼠能誘導(dǎo)出強(qiáng)烈的長時(shí)間的T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)，對靈長類也取得了一些進(jìn)展。但由于HCV具有多個(gè)基因型及血清型，膜蛋白區(qū)同源性小，加之基因突變率高，容易形成沒有逃逸病毒株，缺乏具有交叉免疫保護(hù)效應(yīng)的中和抗體，這些諸多因素給HCV蛋白類疫苗研究帶來了極大困難。
