甲肝:健康肝
通過凝集素親和層析技術(shù)結(jié)合雙向電泳-質(zhì)譜技術(shù)構(gòu)建人健康肝組織ConA結(jié)合型糖蛋白數(shù)據(jù)庫并進行生物信息學(xué)分析;利用研磨和勻漿兩步法抽提人健康肝組織總蛋白,通過固相凝集素親和層析獲得與刀豆凝集素(ConA)結(jié)合型糖蛋白,經(jīng)過雙向電泳、熒光染色、圖像分析獲得人健康肝組織表達譜;通過MALDI-TOF-MS質(zhì)譜鑒定及生物信息學(xué)分析獲得人健康肝組織數(shù)據(jù)庫,并建立了高重復(fù)性的人健康肝組織ConA結(jié)合型糖蛋白表達譜,圖譜均點數(shù)為301+15,挖取139個蛋白點進行質(zhì)譜鑒定,去冗余后確定了85個與細胞周期、代謝通路相關(guān)的蛋白質(zhì);通過NetNGlyc和NetOGlyc對糖基化位點進行預(yù)測,并按照geneontology對其功能定位等進行分類,并對其中與腫瘤發(fā)生發(fā)展相關(guān)的蛋白進行具體分析.由此可見,凝集素親和層析結(jié)合2-DE,質(zhì)譜鑒定是一種高通量的檢測方法,ConA結(jié)合型糖基化修飾譜的構(gòu)建為后續(xù)研究奠定了基礎(chǔ).
人健康肝組織刀豆凝集素(ConA)結(jié)合型糖蛋白組學(xué)研究